抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室

　　王友军教授课题组直博生李佳于2020年1月23日在Cell Calcium杂志（IF:3.932）上发表题为“Visible light excited ratiometric-GECIs for long-term in-cellulo monitoring of calcium signals”的文章。

　　钙指示剂是钙成像实验中必不可少的工具，常被用于细胞及细胞器钙信号的检测。目前已有的钙指示剂种类颇多，但是尚无法同时满足比值型指示和长时程检测钙水平的需求，本研究制作了一类名为VR-GECIs （Visible light excited ratiometric-GECIs）的比值型钙指示蛋白，可用于活细胞钙水平的长时程监控。

　　VR-GECIs的制作原理是将单色钙指示蛋白和可见光激发的荧光蛋白用短肽连接，制成融合蛋白，添加信号肽后可用于检测胞浆、内质网腔、线粒体腔的钙水平。实验结果表明，VR-GECIs保留或优化了母本钙指示蛋白的钙响应能力；荧光比值可以直接用于比较细胞间或细胞内的钙水平差异；同时VR-GECIs由可见光激发，光毒性较低，可用于长时程检测细胞钙信号，检测结果表明，在有丝分裂过程中，HEK-293细胞内质网钙水平维持相对稳定。

　　本研究受中国科学技术部国家重点研发计划2019YFA0802104、国家自然科学基金面上项目NSFC-91954205、NSFC-31671492、中央高校基本科研业务费专项资金2017EYT21的资助，同时受美国Welch基金BE-1913-03302019和美国癌症协会RSG-16-215-01-TBE的支持。

　　文章全文链接：https://doi.org/10.1016/j.ceca.2020.102165