2018年10月,北京师范大学生命科学学院遗传与发育生物学研究所曾少举教授课题组2016级博士生白焕菊在Journal of the Association for Research in Otolaryngology(IF=2.716)发表题为Study of the Mechanisms by Which Aminoglycoside Damage Is Prevented in Chick Embryonic Hair Cells的研究论文。
哺乳动物听觉毛细胞对氨基糖苷类抗生素特别敏感,抗生素使用不当,严重的情况会导致毛细胞死亡脱落,进而损伤听力。我们实验室首次发现鸡胚胎毛细胞对氨基糖苷类抗生素敏感程度低。为了系统的研究这个有趣的现象,我们建立了鸡胚毛细胞体外培养体系,体外培养环境下,加入链霉素,发现E12和E14时期的毛细胞对药物不敏感,未发现损伤的毛细胞,E16天的毛细胞开始出现死亡,E18天的毛细胞损伤程度加大,总之,与出生后小鸡毛细胞相比,胚胎期毛细胞损伤程度低;此外,毛细胞的损伤程度在基底乳突(BP)上呈现一定的梯度,与神经侧毛细胞相比,非神经侧毛细胞更容易受到损伤,与远端毛细胞相比,近端毛细胞更容易受到损伤,这与出生后小鸡毛细胞损伤规律一致。为了研究其中的机制,我们用GTTR荧光标记物追踪药物进入毛细胞的过程,结果,E12 天的毛细胞中未发现GTTR荧光,E14天出现微弱的GTTR荧光,E16到E18荧光强度逐渐增强;在BP上,神经侧荧光弱于非神经侧,远端荧光弱于近端,这个结果表明,毛细胞损伤程度与药物进入毛细胞的量呈正比。为了验证药物进入毛细胞的主要通道是MET通道,我们用BAPTA阻断了MET 通道,结果发现,进入毛细胞中的GTTR的数量显著减少,这一结果表明氨基糖苷类抗生素进入鸡胚毛细胞主要是通过MET通道。为了研究进入毛细胞中的药物在毛细胞中的分布,我们分离出单个毛细胞,并体外培养原代毛细胞,结果发现进入毛细胞中的GTTR没有聚集在线粒体上,这与出生后的小鸡毛细胞是不同的,这一发现为解释胚胎小鸡毛细胞对氨基糖苷不敏感提供了另外一种可能。
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